小鼠CD8+ 細胞分選試劑盒（陽選）
￥3470.00
陽選法試劑盒是利用納米磁珠標記和富集目的細胞，再用釋放劑將磁珠從細胞表面解離，從而得到無磁珠標記的目標細胞。
- 產(chǎn)品貨號:70905-100
- 產(chǎn)品單位:盒
- 產(chǎn)品說明:for 1*10^9 cells
產(chǎn)品特點
? 純度純度達到95%以上
? 樣本適用性廣，可直接捕獲目的細胞給
? 磁珠釋放技術(shù)細胞無磁珠標記
產(chǎn)品信息
應用案例
圖1 BeaverBeads? 小鼠CD8+ 細胞分選試劑盒（陽選法）分選小鼠脾臟細胞，流式細胞儀分析圖
利用BeaverBeads? 小鼠CD8+ 細胞分選試劑盒（陽選法）從C57BL/6小鼠脾臟細胞中分選CD8+細胞，用FITC anti-mouse CD8抗體（克隆號53-5.8）標記后進行流式細胞儀分析。
結(jié)論：分選前后的CD8+細胞純度分別為8.9%和95.1% 。
與美天旎對比如何？
相同點：均能實現(xiàn)高純度、高活性的細胞分選。
不同點：美天旎磁珠因磁珠粒徑小，磁性弱，需要搭配分選柱進行磁性的放大才能實現(xiàn)細胞分離，操作時長約30-60分鐘（分選柱需預沖洗、上樣、洗滌等步驟）。海貍細胞分選試劑盒不需要分選柱，僅需磁力架搭配流式管，最快15分鐘（陰選法）即可分離細胞。
普通的磁力架可以用于細胞分選嗎？
用于細胞分選磁力架的磁場強度要>7000Gs，否則會影響細胞分選效果。
推薦海貍細胞分選磁力架（Cat.No: 60205，60205Ⅱ，60206）。
分選T細胞，樣本處理時要活化嗎（加刀豆蛋白活化）？
我們未對激活處理后的脾臟或淋巴細胞進行T細胞分選驗證。
從理論上講，陰選方式由于不直接結(jié)合目標細胞，通常不受激活處理影響；而陽性選擇則可能受到一定影響，尤其是在T細胞激活后某些表面標志物表達發(fā)生變化的情況下，可能存在洗脫效率降低的風險。
建議客戶在完成細胞分選后再進行激活處理，可以確保分選效果和細胞狀態(tài)的穩(wěn)定性。
一個試劑盒可以分選幾個小鼠脾臟？
正常情況下，一個脾臟大概的細胞數(shù)量是5x10*7-1x10*8。
但細胞數(shù)量與鼠齡、小鼠品系還有單細胞懸液制備都有關(guān)系.
試劑盒里的biotin antibody mix，有沒有封閉Fc受體（FcR）？
沒有封閉Fc受體
可以分選出原代細胞嗎？
可以，海貍的細胞分選試劑盒，從組織或者其他樣本里分選出來的都是原代細胞。
細胞圈門的時候是把所有的細胞都圈入的嗎?
圈所有染上色的細胞，（要看染的部位，細胞碎片、死細胞染不上）。
E1左下角細胞碎片不要圈，P1圈對角線（單個核細胞）
散點圖在流式上比較分散的原因？
可能是磁吸不充分導致的，可以延長磁吸時間或更換磁性更強的磁力架（＞7000Gs）。
做細胞分選用哪款磁珠？
我們自己用的300 nm的SA（Cat. No. 22308C）做細胞分選，包括陽選和陰選。
目前有客戶用的1μm SA（Cat. No. 22307）自己做分選，效果也很好。
細胞分選試劑盒中的磁珠洗滌步驟是否可以用磁力架吸附代替離心？
可以，使用磁性吸附洗滌比離心洗滌效果更好。
細胞分選說明書上要求4℃環(huán)境操作，是否可以在冰上操作？
可以。
分選buffer的配方是什么？
含有2 mM EDTA和2% 胎牛血清（FBS）的PBS或者含有2 mM EDTA和0.5% BSA的PBS，需預先通過0.22μm濾膜過濾除菌?？梢月?lián)系海貍生物購買預配制的分選buffer（Cat. No. 80301）。
自己配制分選buffer時建議使用0.5 M的液體EDTA。原因：固體的EDTA比較難溶解，溶解后也可能會有肉眼看不到的顆粒，所以要過0.22μm的濾膜，但過濾膜可能會損失掉部分EDTA，所以建議用液體的。
為什么海貍的試劑盒需要裂紅后再進行分選？
因為抗體mix中只有少量的紅細胞抗體，防止有紅細胞殘留，所以需要裂紅。
陰選和陽選試劑盒中抗體的區(qū)別？
陽選中只有一種抗體，即針對目的細胞的抗體；陰選中是抗體mix，含有多種針對非目標細胞的抗體。
陽選與陰選的區(qū)別
陽選法：適用樣本類型多種、復雜，抗體類型單一，需要解離試劑，直接捕獲，細胞沒有磁珠標記，有抗體標記，操作時長最快80min，不需要分離柱。
陰選法：適用樣本類型相對單一，抗體類型為多種抗體的混合物，不需要解離試劑；間接捕獲，不影響細胞性能；細胞沒有磁珠標記和抗體標記，操作時長最快25min，不需要分離柱。
分選buffer的配方是什么？海貍可以提供嗎？
含有2 mM EDTA和2% 胎牛血清（FBS）的PBS或者含有2 mM EDTA和0.5% BSA的PBS，需預先通過0.22μm濾膜過濾除菌?？梢月?lián)系海貍生物購買預配制的分選buffer。
細胞樣品制備時需要幾次過篩？具體步驟是什么？
推薦進行2次過篩。
第一次過篩：將樣本置于70 μm細胞篩網(wǎng)篩網(wǎng)上進行研磨/沖洗，收集細胞。
第二次過篩：裂紅完成后，使用PBS重懸細胞，將細胞懸液用70 μm細胞篩網(wǎng)過濾。
若只進行1次過篩，殘留的細胞團塊可能會導致細胞/磁珠聚集，降低分選純度。
磁珠使用前需要清洗嗎？不清洗有什么影響？
磁珠使用前需要用分選buffer清洗2次（清洗方法見說明書）；若不清洗，磁珠保存液中的某些組分（如抑菌劑）可能會影響細胞活性。
抗體和細胞孵育時需要注意什么？
將細胞懸液加到離心管底部，再加入Biotin-Antibody Mix，充分吹打混勻（盡量在底部進行吹打，不要濺到管壁上），4°C孵育 10 min（勿將Ep管插進冰里）。
若孵育時間不足，會使抗體與細胞無法充分結(jié)合，從而導致非目標細胞殘留，影響分選純度。
磁吸時需要注意什么？
要使用細胞分選專業(yè)磁力架，推薦（Cat. No. 60205/60206），靜置5分鐘，磁吸后轉(zhuǎn)移大部分懸液至新管，注意不要吸到磁珠。磁吸時間過短可能會導致部分磁珠未完全吸附，分選后的細胞中有磁珠殘留，且影響分選純度。
離心條件是否有統(tǒng)一標準？
常規(guī)離心條件為500 g，5分鐘（磁珠清洗除外，需10000 g，1分鐘）。離心速度過大（超過500g）影響細胞活性。
小鼠CD8+細胞分選試劑盒（陽選法）可以從B6（小鼠）的腎臟中提取CD8+T細胞嗎？是否能達到脾臟的純度和分選率？
理論上是可以的。
小鼠CD8+T細胞磁珠法分選試劑盒可以用于腫瘤細胞嗎？
理論上可以使用小鼠CD8+細胞磁珠法分選試劑盒（陽選法）（Cat. No. 70905）。
暫無視頻
暫無應用案例
