應用場景一：mRNA純化

mRNA是一類攜帶遺傳信息且能指導蛋白質合成的單鏈核糖核酸，滿足合成各種蛋白質的所有遺傳信息的要求。許多研究發(fā)現(xiàn)，mRNA可作為許多疾病診斷的工具，包括腫瘤、胃腸道疾病、心血管疾病、關節(jié)炎、中樞神經系統(tǒng)疾病等。

mRNA序列由5個關鍵結構元件組成：5'帽結構（Cap）、5'非翻譯區(qū)（UTR）、編碼區(qū)（CDS）、3'非翻譯區(qū)（UTR）和poly（A）尾巴。（圖1）

圖1.mRNA結構示意圖

Oligo dT磁珠是最常用的mRNA捕獲載體之一，其表面的oligo dT與真核生物mRNA的poly A尾互補配對，能夠快速高效地從總RNA、細胞裂解物或帶有poly A尾的體外轉錄RNA樣本中分離純化mRNA，下游應用于PCR檢測和建庫測序。

圖2.mRNA的qPCR或建庫測序檢測流程圖

應用場景二：核酸探針捕獲

Oligo dT磁珠的另一類廣泛應用，即固定poly（A）標記的核酸探針，進行目標序列核酸捕獲，下游應用于qPCR檢測。

圖3.目標核酸的qPCR檢測流程圖

核酸探針和磁珠固定的方法有共價、親和作用、堿基互補配對、離子或偶極作用等方式，根據用于場景不同各有優(yōu)缺點。目前也有一些分子診斷試劑開發(fā)企業(yè)選擇oligo dT磁珠作為核酸探針固定的載體。

表1. 磁珠表面核酸探針固定的技術之間的比較

一些分子診斷技術是利用oligo dT磁珠固定肽-寡核苷酸，分離純化血清中HBV DNA。研究結果顯示oligo dT磁珠的靈敏度比常規(guī)方法的靈敏度高100倍，且核酸的完整好，實驗結果重復性高CV達到0.05%。

磁珠推薦

BeaverBeads? Oligo(dT)磁珠表面共價偶聯(lián) Oligo(dT)，可高效地從真核生物總RNA或直接從動植物組織或細胞裂解物中快速分離出完整、高純度的mRNA；也可固定poly（A）標記的核酸探針，用于目標序列核酸的捕獲

分離得到的mRNA和靶標核酸可用于多種分子生物學實驗:RT-PCR、固相cDNA 文庫構建、RACE、Northern等。

產品特點：

a)    表面活性位點豐富，mRNA捕獲效率高

b)    表面特殊封閉，非特異性吸附低

c)    超順磁性微球，可配套自動化設備實現(xiàn)高通量操作

d)    工業(yè)化規(guī)模生產，批次穩(wěn)定

圖4.oligo dT磁珠結構示意圖

mRNA純化數(shù)據：

樣本：人細胞Total RNA

上樣量：300ng Total RNA

磁珠用量：20-50uL

實驗結果：

實驗操作過程中，BeaverBeads Oligo (dT)磁珠的懸浮性與進口品牌相當。從人細胞total RNA樣本中純化mRNA，采用熒光定量PCR對樣本進行定量檢測，對mRNA（特異性）和sRNA（非特異性）檢測的Ct值偏差＜0.1，兩品牌磁珠無明顯差異。

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